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產品簡介
BlueKit® 系列 BCA快速蛋白定量檢測試劑盒具有靈敏度高、結果穩定、操作簡捷等特點。本試劑盒的檢測原理是Cu2+在堿性的條件下，被蛋白質還原成 Cu+，Cu+和BCA 相互作用形成紫色的反應絡合物，可在 562 nm 處顯示強烈的吸光值，與蛋白濃度呈現良好的線性關系。，柏萊源生物代理Hillgene公司產品，請咨詢我們貨期準確產品信息及報價！
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貨號： HG-BC001
BlueKit® 系列 BCA快速蛋白定量試劑盒具有靈敏度高、結果穩定、操作簡捷等特點。本試劑盒的檢測原理是Cu2+在堿性的條件下，被蛋白質還原成 Cu+，Cu+和BCA 相互作用形成紫色的反應絡合物，可在 562 nm 處顯示強烈的吸光值，與蛋白濃度呈現良好的線性關系。
檢測范圍： 10~2000 μg/mL
靈 敏 度：0.39μg/mL
250 T
適用于各類樣本中總蛋白的定量檢測。
| 組分 | 規格 | 配制 |
|---|---|---|
| 標準蛋白S1~S7，S0 | 1.5mL/ 管 | 即用型 |
| A液 | 10mL ×5 瓶 | 即用型 |
| B液 | 1mL ×1 管 | 即用型 |
| 樣本裂解液 | 50mL ×1 瓶 | 即用型 |
試劑盒所有組分室溫儲存。可穩定保存12個月 。
1. 酶標儀、恒溫培養箱。
2. 微量移液器及吸頭。
3. 去離子水、全新濾紙、渦旋振蕩器。
用慢病毒樣本裂解液稀釋樣本。慢病毒樣本建議稀釋 40 倍，即 5 μL 慢病毒樣本中加入 195 μL慢病毒樣本裂解液。如不在標準曲線范圍內，調整稀釋倍數。
1.按需用量配制適量 BCA 工作液。試劑 A 與試劑B 以體積比 50:1 混合，充分混勻。
2.微孔板中加入 50 μL 標準蛋白、待測樣本。
3.加入 200 μL BCA 工作液。
4.室溫反應 20 分鐘
5.酶標儀 562 nm 波長測量吸光度值。
6.計算標準蛋白和待測樣本的實際吸光度值(即各孔吸光度值 － 空白平均吸光度值）。
7.繪制標準蛋白曲線，擬合回歸方程，計算待測樣本蛋白濃度。
1.標準曲線OD處理(見下例，僅為示例，具體以實際測定為準)。
| 標準品濃度(μg/mL) | O D 值 ( 1 ) | O D 值 ( 2 ) | 平均值 |
| 2000 | 1.7229 | 1.7210 | 1.7220 |
| 1000 | 1.0423 | 1.0500 | 1.0462 |
| 500 | 0.6408 | 0.6380 | 0.6394 |
| 200 | 0.3519 | 0.3540 | 0.3530 |
| 75 | 0.2098 | 0.2094 | 0.2096 |
| 25 | 0.1424 | 0.1430 | 0.1427 |
| 10 | 0.1196 | 0.1190 | 0.1193 |
| 0.00 | 0.1039 | 0.1039 | 0.1039 |
2.以標準品理論濃度與對應OD值取雙log后進行線性擬合，得到標準曲線(如下圖所示)。
1. 每次使用前請檢查試劑是否出現沉淀。如果有沉淀，請在 37℃溫浴，溶解沉淀后再使用。如果有任何試劑出現變色或微生物污染即丟棄。
2. BCA 法測定蛋白濃度時，吸光度會隨時間的延長不斷加深，因此所有樣品的測定需在 10 分鐘內完成，否則會影響蛋白定量的準確度。
3. 待測樣品中如含有較高濃度的非離子型表面活性劑，普通 Lowry 法會因反應液出現沉淀而無法檢測，BCA 檢測法則不會有此情況發生，但是會導致待測樣品顯色反應加深，仍將產生測定誤差。樣品中大多數離子型和非離子型表面活性劑的影響。
4. 待測樣品中如含有鰲合劑，或處于強酸、強堿條件則會導致負吸收值。
5. 如含有脂類物質會導致吸收值明顯升高。
6. 如因上述干擾因素存在，造成測定誤差，請通過稀釋、透析或其他處理方式，使干擾物質濃度降至BCA 檢測最大兼容濃度以下。
7. 如果酶標儀沒有 562 nm 檢測波長，540 - 590 nm 之間的波長也可接受。
8. 為了您的安全和健康，請穿戴實驗防i護服、手套、口罩等必要的防護裝備。
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