貨號： HG-BE001

產品簡介：

全能核酸酶 ELISA  檢測試劑盒用于檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中核酸酶的殘留含量。 

本試劑盒應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術測定樣品中全能核酸酶（以下簡稱核酸酶）的微量殘留。用捕獲抗體包被 96 孔酶標板，制成固相抗體，隨后加入標準品和檢測樣品，再加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的標記抗體，形成一個固相抗體-核酸酶-標記抗體的三明治結合物，反應結束后洗滌，然后加入底物進行顯色反應，底在HRP的催化下轉化成藍色，并在終止液的作用下轉化成最終的黃色。在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算待測樣品中核酸酶的含量。

規格：

96 T

產品組成：

備注：試劑保存溫度為2~8℃，顯色液A和顯色液B應避光保存。

產品儲存條件與有限期：

未開封的試劑盒， 2-8℃條件下有效期為12個月。

本試驗所需自備試驗器材：

1. 酶標儀、酶標板恒溫振蕩器或恒溫培養箱、洗板機。 

2. 高精度移液器及一次性吸頭（0.5-10µL、10-100µL、30-300µL、100-1000µL）。 

3. 去離子水、吸水紙、 EP管。

試劑準備：

1.1×洗液：取洗液（20×）1份，加19份去離子水配制成工作濃度洗液（1×）。洗液（20×）中如果有結晶形成，應置于室溫或37℃水浴輕輕搖晃，待結晶完i全溶解后再進行稀釋。未用完的洗液（20×）應置于2-8℃儲存。 

2. 標準品的配制：用樣品稀釋液將標準品稀釋至5ng/mL，然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標準品。 

3. 底物液的配制：使用前i十分鐘將顯色液A、顯色液B等體積混合，避光。確保底物液不被污染，如混合后的底物液已經變藍，請勿使用。

試劑準備：

詳見樣品前處理試劑盒（貨號為HG-CL100）操作說明書。

2. 標準品的配制：用樣品稀釋液將標準品稀釋至5ng/mL，然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標準品，如下圖：

3. 樣品溫育：設置標準品孔、空白孔和樣本孔，標準品孔按順序加入不同濃度的標準品100µL，空白孔加入樣品稀釋液100µL，樣本孔中加入待測樣本100µL，用封板膜封板，然后置于37℃溫育1h。

4. 洗板：棄去孔中液體，用1×洗液洗板3次（250µL/孔），拍干樣品孔中的殘留液體。（每次加入洗液后，如采用手洗板，加洗液后可靜置1min并輕微震蕩；如采用洗板機洗板，加洗液后可輕微震蕩5s。） 

5. 酶標抗體溫育：每孔加入100µL酶標抗體，用封板膜封板，然后置于37℃溫育1h。 

6. 洗板：同步驟4。 

7. 顯色：將預先配置好的底物液加入酶標板中，混勻（100µL/孔），用封板膜封板， 37℃避光溫育15min。 

8. 終止：加入終止液， 100µL/孔。 

9. 讀數：在酶標儀中測定雙波長450/630nm處的OD值，測定應在終止后20min內完成。

結果處理：

以核酸酶標準品的OD值（OD450nm-OD630nm）為因變量Y，以標準品濃度為自變量X做曲線。推薦使用四參數Logisitic數學模型擬合方程： Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D，以樣品OD值（OD450nm-OD630nm）代入公式計算樣品中核酸酶的含量）。

標準曲線：

實驗檢測結果：

注意事項：

1. 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。

2. 試劑盒必須在有效期內使用。 

3. 試劑盒內所有組分都必須恢復至室溫（18-25℃）后方可使用。 

4. 試劑盒各組分使用前充分混勻，板條洗滌后拍干時，注意防止板條脫落。 

5. 只有嚴格遵守說明書的操作方法，全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優良檢測效果。 

6. 注意在不同樣本和步驟間及時更換加樣槽和吸頭，避免交叉污染。 

7. 最終的試驗結果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗環境密切相關。 

8. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。

注意事項：

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效期保障：嚴格把控產品質量，確保試劑效期新鮮，保障實驗結果的可靠性。

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